结核病分子诊断之XpertMTBR

7月7日，国家卫计委颁布了《国家卫生计生委办公厅关于调整肺结核传染病报告分类的通知》（国卫办疾控函[]号），要求：

（1）、乙类传染病肺结核分类由“涂阳、仅培阳、菌阴、未痰检”调整为“利福平耐药、涂阳、仅培阳、菌阴、未痰检”；

（2）、责任报告单位和责任报告人对诊疗过程中发现的利福平耐药（含耐多药）的肺结核患者，应当在传染病报告卡中填报肺结核（利福平耐药）。

这就要求在检测结核分枝杆菌的同时，也必需检测利福平耐药情况。

为什么要求检测利福平耐药情况呢？其实有大数据结核杆菌耐药基因测序研究显示，如果结核杆菌对利福平耐药，那么有接近90%的菌也会同时对异烟肼耐药，临床上把这种情况成为“耐多药结核病”（WHO推荐使用二线药物治疗）。同时，在耐药结核病的划分中，也单独把利福平耐药的情况划分出来，利福平耐药结核病(rifampicinresistance-tuberculosis,RR-TB):是指结核病患者感染的结核分枝杆菌体外DST证实对利福平耐药的结核病，包括任何耐利福平的结核病，即利福平单耐药结核病(Rifampicinmono-resistanttuberculosis,RMR-TB)、利福平多耐药结核病(Rifampicinpoly-drugresistanttuberculosis,RPR-TB)、MDR-TB和XDR-TB等。可见利福平耐药在耐药结核病中有着不可“忽视”的地位！

目前临床是否有相关检测项目，在检测样本中是否存在结核杆菌的同时一起检测利福平耐药？当然有！这就是WHO推荐的用于快速诊断成人及儿童肺结核和肺外结核以及利福平耐药的检测——结核分枝杆菌及利福平耐药检测（XpertMTB/RIFAssay）。

检测原理

运用巢式PCR的原理，根据利福平耐药决定基因（rpoB基因）的81bp区，以野生型为模板设计了5条探针。探针与目标序列结合后会释放荧光被检测到，通过不断的循环扩增荧光信号不断加强。这5条探针如果同时结合到检测样本，就有5条不同颜色的光谱显示，说明检测到结合分枝杆菌的存在，而且未发生耐药（没有发生基因突变，以野生型为模板设计能被探针能结合上），如果其中有任意一条探针未被结合上，则没有相应的荧光信号，则说明该探针所对应的基因序列处已发生突变，提示有利福平耐药。

报告结果

未检测到结核分枝杆菌、检测到结核分枝杆菌/利福平敏感、检测到结核分枝杆菌/利福平耐药

Xpert在临床科室的应用

XpertMTB/RIF是一项在全球获得广泛认可的结核快速诊断技术，世界卫生组织（WHO）自年起就推荐其作为活动性结核病及利福平耐药的快速诊断方法，尤其是对结核高负担国家应作为结核快速检测及耐多药结核（MDR-TB）快速筛查的首选检测方法进行使用。XpertMTB/RIF已被列入我国结核诊疗指南作为活动性结核病诊断的标准之一，可在多个临床科室中运用。

呼吸科/结核科

肺结核的诊断

耐多药结核（MDR-TB）的筛查

呼吸系统疾病和结核的鉴别诊断

胸水/心包积液鉴别诊断

矽肺和矽肺结核的鉴别诊断

传染/感染科

肺外结核的诊断

耐多药结核（MDR-TB）的筛查

HIV感染者并发结核的诊断

儿科

儿童肺结核的诊断

儿童肺外结核的诊断

儿童耐多药结核（MDR-TB）的筛查

其它

骨科：骨关节结核的诊断

神经内科：结核性脑膜炎的诊断

标本类型

痰、脑脊液

肺泡灌洗液

骨与关节组织的脓液

其它：淋巴结穿刺组织、胃液、胸膜活检组织等

上图：取痰正确步骤

金域大数据

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长按







































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